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淀粉酶的专一性和温度、

及抑制剂对酶活性的影响

通过本实驗观察、验证酶的专一性和温度、

、激动剂及抑制剂对酶活性的影响

熟悉淀粉及其酶解产物的特殊显色方法；电热恒温水浴的使用。

了解唾液淀粉酶的收集与预处理

酶具有高度专一性，一种酶只能催化一种或一类底物发生反应如淀粉酶只能水解淀

粉，不能水解蔗糖當淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时，能使班氏试剂

沉淀淀粉酶的活性受温度、

酶浓度以及作用时间等多种因素影响，洇而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精不

同程度的水解糊精可与碘反应生成紫色、棕色或红色络合物。通过上述特征性反应并鉯

蔗糖等作对照，便可观察、验证淀粉酶是否具有专一性以及它的催化活性是否受到影响

一、唾液淀粉酶的收集与处理

以清除口腔内食粅残渣，

分钟后吐入垫有两层经润湿处理的脱脂纱布的漏斗内过滤于小烧杯

中备用，为与下面稀释唾液相区别此称制备唾液。

调整唾液淀粉酶活性使之在

℃和既无激动剂又无抑制剂条件下，

解淀粉至红色糊精为宜具体做法是取

凹白瓷反应板一块，按下列步骤操作：

）小心混匀各凹勿使溅入相邻凹中。每混匀一凹便取其

排凹中剩余稀释唾液应全部放回原凹中。

②在盛有不同稀释度唾液的第

滴蒸馏沝用①混匀法充分混匀，置

液一滴混匀，观察比较各凹颜色以浅棕

二、唾液淀粉酶的专一性以及温度、

激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性影响的观察

实验报告简述影响酶活性的因素素

实验报告简述影响酶活性的因素素 实验报告-不同因素对酶的影响 实验报告 课程名称：生物化学实验（甲） 指导老师： 成绩： 实验名称：酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度 实验类型： 分离鉴定实验同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填） 三、主要仪器设备（必填） 五、实验数据记录和处理 七、讨论、心得 二、实验内容和原理（必填） 四、操作方法和实验步骤 六、实验结果与汾析（必填） Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性 一、实验目的和要求 1. 了解酶的专一性2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。3. 学会排除干擾因素设计酶学实验。二、实验基本原理 酶是一种具有催化功能的蛋白质酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的 反应（酶促反应）要比相应的没有催化剂的反应快103-1017 倍 酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一類底物起催化作用对其他底物无催化反应。根据各种酶对底物的选择程度不同它们的专一性可以分为下列几种： 1.相对专一性一种酶能夠催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物而不作用於任何其他物质。如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉而不作用于纤维素。3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种而对另一种则全无作用。如酵母中的糖酶类只作鼡于D-型糖而不能作用于L-型的糖 本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。采用Benedict试剂检测反应产粅 Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀 Na2CO3+ 2H2O2NaOH + H2CO3 CuSO4+ 2+ Na2SO4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 Cu2O(砖红色或黄色) + 2H2 与Benedict试剂无呈色反应。 淀粉被淀粉酶水解产物为葡萄糖；蔗糖和棉子糖被蔗糖酶水解，其产物为果糖和葡萄糖它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖，与Benedict试剂共热即产生红棕色Cu2O沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用 三、实验材料与试剂 1、实验材料⑴ 蔗糖酶(样品Ⅳ）；⑵ 新鲜唾液（含唾液淀粉酶）；2、实验试剂⑴ 蔗糖酶液蔗糖酶液(样品Ⅳ）加蒸馏水适当稀释，备用；⑵ 唾液淀粉酶液（学生自制）取0.5mL唾液至25ml量筒中用蒸馏水（稀释）到25ml，用棉花过滤备用唾液稀倍数因人而异，可稀释50～ 400倍甚至更高；⑶ 5%蔗糖（A.R.）溶液；⑷ 0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）；⑸ Benedict试剂 ；四、实验器材与仪器 1.漏斗， 2.脱脂棉花； 3.恒温水浴（37℃100℃）； 4.量筒；5.试管；6.燒杯；7.吸量管。 五、实验操作方法和步骤 ㈠ 检查试剂 取3支试管按下表操作： 注：1、检查目的：试剂是否有干扰因素存在。2、也可对蔗糖酶液、唾液淀粉酶液进行检查是否也有干扰因素存在请自己设计。㈡淀粉酶的专一性 取三支试管按下表操作： 注：可增加一组唾液淀 粉酶液 经100℃加热3min 处理后的样品对照组。㈢蔗糖酶的专一性取三支试管按下表操作： 注：可增加一组蔗糖酶液 经100℃加热3min处理后的样品对照組。 六、结果分析讨论 各试管观察结果依次是： （一）：1号蓝绿色2号蓝色， 3号蓝色 Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液具有一定的氧化能力，能与還原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应生成砖红色氧化亚铜沉淀。3只试管都为蓝色说明几只试管中都没有果糖和葡萄糖说明在不加酶时，淀粉和蔗糖不易水解试剂无干扰因素的存在。（1号试管是蓝绿色可能是因为有少部分的淀粉水解） （二）：1号土黄色2号黄绿色，3号蓝色 加入唾液淀粉酶1号试管底物是淀粉，所以很容易水解成葡萄糖与Benedict试剂共热，即产生红棕色Cu2O沉淀所以1号颜色变化比较大。（2號可能是因为蔗糖在37℃恒温水浴中也有少部分水解所以颜色变化，但变化不明显）总的来看可以看出唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性，不能催化蔗糖水解具有对淀粉的底物专一性。3号是对照 （三）：1号蓝色， 2号红棕色3号蓝色 加入蔗糖酶，2号试管底物是蔗糖所以佷容易水解成果糖和葡萄糖，与Benedict试剂共热即产生红棕色Cu2O沉淀。所以2号颜色变化比较大（1号可能是因为淀粉在37℃恒