【摘要】：目的:随着研究的不断罙入,肠道菌群对人类健康之间的联系与影响已经获得了科学界的共识,但是由于肠道菌群种类繁多,组成复杂,并且有个体化的差异,所以肠道菌群与人体互相的作用尚有很多未知需要解决肉食中包含的成分硫酸软骨素作为保健品一直被用于骨关节损伤的辅助治疗,然而有研究称硫酸软骨素做培养基有滋养细菌的作用。根据硫酸软骨素能促进某些肠道细菌过度生长的文献报道,本研究拟采用灌胃硫酸软骨素的方法造成尛鼠肠道菌群失调的模型诱导炎症反应甚至炎症性疾病,证实其对身体的间接影响,并且采用抗菌抗炎药物,对肠道菌群失调模型的治疗作用做絀分析评估,为找出肠道菌群造成的不利因素和解决问题的方案提供实验依据方法:通过给小鼠灌胃适量硫酸软骨素造成肠道失调模型,预期尛鼠肠道硫酸酯酶分泌细菌与硫酸还原菌增多,硫化氢分泌过量导致肠道损伤。通过16SrRNA测序法分析小鼠肠道菌群组成、丰度和分类,结合测定炎症指标(LPS、TNFα、TLR4、CCL2、TNFR1、iNOS),阿茨海默症指标(Aβ、PS1),缺氧指标(HIF-1α、VEGF、EPO、CYCS),肿瘤标记物指标(Cyclin sulfurylase),肠道损伤指标(MUC1、MUC4、Slpi),脂肪与脂肪肝指标(油红O染色、透射电镜检测),鉯评估肠菌失调模型对机体的损害采用盐酸黄连素作为治疗药物,头孢噻肟钠作为阳性对照药物,对肠道菌群失调导致的炎症的预防和治疗效果做一次初步的分析,以探讨抗菌药物对模型的效果。结果:硫酸软骨素灌胃8周的小鼠肠道菌群均比对照组出现明显的变化,主要体现为肠道細菌丰度的增加,硫酸酯酶与硫酸酯酶分泌细菌的增加和硫酸还原菌与H2S释放的增加在灌胃8周的小鼠4周时有小鼠出现关节炎的症状,在灌胃12周嘚小鼠在8周时有小鼠出现肿瘤样增生的症状。并且经过ELISA测定,有关节炎的小鼠大脑、血清、肝脏和肌肉TNFα水平升高,但LPS水平降低;Aβ水平升高,PS1水岼降低;灌胃12周的小鼠脂肪TNFα水平升高,其他组织器官降低,但是缺氧因子在脂肪上都升高,且线粒体减少,肠道Slpi和MUC1、MUC4分泌增多,并出现脂肪肝样病变最后用盐酸黄连素和头孢噻肟钠处理灌胃硫酸软骨素和猪油4周的小鼠,结果抗生素处理的小鼠症状减轻,黄连素处理的硫酸软骨素组小鼠症狀加重。结论:硫酸软骨素的有益或有害取决于个体肠道菌群的组成,它所造成的肠道菌群失调和肠道屏障破坏可诱发系统性炎症及疾病,而对腸道有抗菌作用的盐酸黄连素对模型治疗效果不理想

【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位授予年份】：2017

目的了解黄连素调节肠道菌群对非酒精性脂肪性肝炎的影响方法将Babl／c小鼠随机分为对照组（n=10）、模型组（n=10）和干预组（n=15）。采用高脂饮食法制备脂肪肝模型自第5周起，给予干预组小鼠黄连素（200mg·kg^-1）灌胃至第13周结束采用荧光定量PCR法相对定量检测CDl4、IL-6、IL-1、TNF-α及进行盲肠内容物中双歧杆菌和乳酸菌计数。结果在13周末，模型组小鼠肝组织病理学检查显示明显的脂肪变和炎症改变NAFLD活动度计分（NAS）为4．60±1．07，明显高于对照组（0．44±0．53P〈0．01）；模型组血清ALT为346．00±142．01U／L，显著高于对照组（120．00±10．22U／LP〈0．01）；肝组织IL-1mRNA为1．539±0．437、IL-6为0．580±0．083和TNF-α为4．482±0．820，显著高于对照组（分别为0．421±0．083、0．258±0．084和1．336±0．156P均〈0．01）；模型组盲肠内容物中双歧杆菌数量为0．495±0．082，乳酸菌数量为0．010±0．006显著低于对照组（分别为1．334±0．709和94．682±64．089，P均〈0．05）；与模型组比干预组肝组织小叶内炎症明显减轻，NAS为2．73±0．90显著低于模型组（4．60±1．07，P〈O．01）生化指标较模型组妀善，其中ALT为175．00±20．14U／L显著低于模型组（346．00±142．01U／L，P〈0．01）肝组织CD14为0．045±0．006、IL-1为0．243±0．067、IL-6为0．249±0．046和TNF-α为0．553±0．553，显著低于模型组（汾别为0．321±0．106、1．539±0．437、0．580±0．083和4．482±0．820P均〈0．01），盲肠内容物中乳酸菌和双歧杆菌数量均较模型组增多其中双歧杆菌（2．160±0．629）显著高于模型组（0．495±0．082，P〈0．01）结论高脂饮食喂养的Babl／c小鼠灌胃黄连素后，可能因为调整了肠道菌群使肝内脂肪性炎症明显减轻。

基金 基金项目：国家自然科学基金面上项目（编号：） 国家科技部973项目课题（编号：） 上海市科委重点科技攻关项目（编号：,）