华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 摘 要 目 的：探讨运用RNAi 技术沉默Bmi-1 基因对人胰腺癌细胞恶性行为的影响为 胰腺癌基因治疗提供新的靶点和思路。 方 法：构建反义Bmi-1 真核表达载体转染人胰腺癌PANC-1 细胞运用MTT 、荧 光显微镜下观察、Western-Blot 等技术检测转染效果；运用流式细胞术检测细胞周期、 凋亡变化；RT-PCR 检测P16INK4A 表达变化；甲基化特異性PCR 检测P16INK4A 启 动子甲基化变化。 结 果：（1）成功构建反义Bmi-1 真核表达载体并且转染效率较高、效果明显（2 ） 转染后细胞周期出现阻滞，凋亡奣显增加（3 ）转染后P16INK4A 表达上升其启动子 甲基化程度下降。 结 论：Bmi-1 可作为胰腺癌基因治疗的靶点Bmi-1 可能是通过影响启动子甲基 位 论 文 前 言 腫瘤的发生发展是多种因素下致原

内容提示：乙型竉s窝撞《綳蛋白促P16INK4A基因启动子甲基化及其机制的研究

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