摘 要 目 的： 用自制鼠尾胶原建立膠滴肿瘤药敏检测技术(collagen gel droplet culture-drug sensitivity test, CD-DST) 探讨该技术在肿瘤药物敏感性检测中的应用价值，从而为临床化疗方案的筛选提供一条 有效途径 方 法： 首先，構建体外细胞培养的三维立体模型即将 Hela 细胞加至由自制鼠尾胶原、10×F12 培养 基以及0.5 mol/L 的NaOH 溶液混合形成的胶原混合液中并使其凝固，形成利于細胞生长的鼠尾胶原 凝胶滴并观察培养在此模型内细胞的生长形态与二维培养形态学上的不同；进一步，建立胶滴肿 瘤药敏检测技术（CD-DST ）该技术主要包括Hela 细胞在胶滴内培养、化疗药物处理、无药培养 和图像分析四部分内容，同时与MTT 检测法进行相关性比较；最后将该技術初步应用于 12 例活 检宫颈癌标本的体外药敏检测。 结 果： 1、细胞- 鼠尾胶原混合液置于37℃CO2 体积分数为5%的饱和湿度培养箱中15 min 即可凝固， 形成鼠尾胶原凝胶滴（即三维立体模型）培养在其内的 Hela 细胞生长良好，呈克隆样增殖细胞 以团块状分散在胶滴内；二维培养的细胞呈不规則多边形，以单细胞形式平铺分散样生长 2 、用鼠尾胶原成功建立了胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)，两种不同的方法对Hela 细胞进行 药敏检测时发现CD-DST 法所测的药物抑制率明显高于MTT 法(P<0.05)但两者的体外药敏结果有 较好的一致性。 3、12 例宫颈癌标本通过CD-DST 法进行药敏检测其中6 例标本培养成功并鼡于药敏检测， 标本可评价率为50% （6/12 ）；不同标本对化疗药物的敏感性不同体现了肿瘤患者之间存在个体差 异。 结 论： 1、本研究建立了体外细胞培养的三维立体模型该模型的建立对于观察细胞在模拟类似人体环 境中的生长状态和增殖方式提供了一个直观、可靠的体外培养模型，同时为以后研究癌细胞在体内 的生长、转移、耐药及抗癌药物敏感性检测等方面奠定了基础 2 、用自制鼠尾胶原建立的胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)可用于体外敏感性药物的筛选，并 可反映出个体对肿瘤药敏的异质性；检测时细胞用量少(3 ×l03个细胞/孔) 扩大了临床应用范围，茬 体外药敏检测中具有可行性 关键词：鼠尾胶原；胶滴肿瘤药敏检测；宫颈癌 论文类型：A (基础研究) 基金项目：高层次人才启动基金项目 （RCZX200682 ） I Abstract

一、spike蛋白来源b细胞表位多肽及抗體在sars冠状病毒感染中作用机制研究二、ev71病毒基因工程亚单位疫苗的制备及鉴定