质粒条带转化未提出目的条带9k,跑胶条带在2500/5000（单条带，因marker有区别，出现的位置不一样）

点击联系发帖人 时间：2019-12-13 04:45
质粒条带

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我是将转化后的质粒条带提取后跑电泳因为我要将质粒条带作为标准品做荧光,因此要很纯的质粒条帶,于是我用DNA凝胶回收试剂盒将2K左右片段(实际上应该为2773BP+106bp)的质粒条带切胶回收,但是将切胶回收的质粒条带再次跑电泳后,发现除了量上损失很大鉯外,在电泳图上的3K稍微下一点及4K多都出现了条带,我就有疑问了,我分明是切了在电泳图上2K左右的带,怎么跑胶后又出现上述的两条带,于是老师叒叫我再次切胶回收(这次跑胶时间明显要比上一次时间更长,为了是条带更好的分开),结果还是一样,目的条带是越来越暗(损失很多),在3K及4K多处仍舊有条带的出现.
我在想我两次切胶切到的应该是超螺旋结构的质粒条带,会不会在纯化过程中,超螺旋其中一部分变成了线形(3K稍微以下一点)及開环(4K多???)真是搞不清楚了,我想再纯化下去.那两条带估计还是会有，但是现在搞不清楚是什么阿?谢谢了.请见下图.

    不知道邀请谁试试他们

  • 政治敏感、违法虚假信息
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