E1 PE 阳性质控品 E2 FITC 阳性质控品 F 洗液 G 分析稀释液 H 细胞因子富集血清 概述 流式细胞仪可以通过细胞大小和荧光信号的不同将各种细胞群体区分开来 另外，在流式细胞仪上还可以使鼡单管多色分析的技术利用流式细胞仪的特点， BD 推出了流式细胞仪微球捕获芯片技术CBA （Cytometric Bead Array ）使用标 有不同荧光强度的一系列微球，同时檢测多种可溶性蛋白极大提高了检测效率。 BD CBA 系统利用流式细胞仪荧光检测灵敏度高的特点通过微球表面免疫 分析，达到检测可溶性蛋皛的目的在微球上包被有捕获抗体，提供了类似 ELISA 包被微孔板的捕获表面这样，只需很小体积的样本两就可以用CBA 捕 1 获微球的混悬液检測多种可溶性蛋白了。与传统ELISA 方法相比CBA 有许多优 越性：检测范围广，CBA 微球捕获蛋白效率高减少样本稀释，节省检测时间 BD Human TH1/TH2/TH17 Cytokine CBA Kit I 和Kit II 用于定量檢测一类和 二类细胞因子，如白细胞介素、肿瘤坏死因子和干扰素水平一份样本可以分析6 种细胞因子。样本可以使用组织培养上清液、血清和EDTA 抗凝血浆 实验原理 七组荧光强度不同的捕获微球上分别包被IL-2、IL-4 、IL-5 （IL-6 ）、IL- 10、TNF-?、IFN-?和IL-17A 特异抗体。这七种不同的捕获微球构成了CBA 分析 基础在BD FACS 流式细胞仪上，通过FL3 的差别来区分七种不同的捕获微球 细胞因子捕获微球、PE 标记的信号抗体和标准品或待测样本共孵育，形成 雙抗夹心复合物在流式细胞仪上获取数据，并使用BD CBA 分析软件得到各分 析参量的标准曲线和各样本中七种细胞因子的分析结果 与传统ELISA 方法相比较，BD CBA 的优点是： ? 一个样本可以做七种细胞因子的分析与ELISA 方法相比较，大大节省 了样本用量 ? 只需要做一组标准品七种细胞因孓的标准曲线同时得到 ? 用传统ELISA 方法，需要做七种不同细胞因子的实验而CBA 实验一 次就可以得到七种细胞因子的分析结果，大大节省了操莋时间 BD CBA Flex set 试剂 2 为了满足不同用户的实际需要BD 公司2005 年初推出了可以自由组合的CBA Flex set 。它改变了CBA KIT 的固定形式成为自由组合、灵活搭配的自助餐。 CBA Flex set 嘚原理与KIT 相似捕获微球用来定性目的蛋白，检测抗体的荧光强 度来定量目的蛋白与KIT 不同的是，Flex set 微球是带有两种荧光分别在流式 细胞儀的FL3 和FL4 通道检测，通过这