【摘要】:分别构建荧光蛋白(FP,fluorescenceprotein)与Mac-1嘚两个亚基(CD11b,CD18)融合蛋白表达载体,并在鉴定pYFP-CD18和pCD11b-BFP共转染的CHO细胞(CHO-Mac-1-FP)表达的Mac-1-FP(Mac-1fusedwithfluorescenceprotein)具有与正常白细胞表达的野生型Mac-1基本一致的结构与功能的基础上,结合应用PE标記的CD11b单抗,通过激光共聚焦封片显微镜观测CD11b,CD18在PMA刺激和ICAM-1结合后于胞内的走向与归宿.结果显示:(ⅰ)在静态的细胞膜上看不到Mac-1,PMA活化后1h,胞膜上可见CD11b-PE和YFP-CD18群集,2h后内吞,内吞后YFP-CD18的荧光减弱,提示Mac-1有部分降解;24h后PMA再次活化,部分CD11b-PE与YFP-CD18可再次出现在膜上,说明Mac-1还可以被循环利用.(ⅱ)ICAM-1包被磁珠与Mac-1-FP-CHO细胞作用后,4h内粘附增加,同时伴有Mac-1-FP的群集,8h后粘附减少,同时伴有Mac-1-FP的荧光逐渐减弱,这一过程与PMA活化后Mac-1-FP的变化过程类似,提示ICAM-1作用后也可能出现内吞并降解.由以上结果可鉯得出结论,Mac-1活化后的走向是由胞浆内转位到质膜上,然后内吞,内吞后被降解或可被再利用,与此同时粘附活性亦发生相应的变化,提示受体介导性内吞是白细胞粘附活性降低的重要机制之一.
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抗淬灭剂Ⅱ(荧光增强、持久发光)(+DAPI) |
组织切片制片处理试剂专题 |
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葡萄糖一6一磷酸脱氢酶(G6PD)定量检测试剂盒 |
通用型谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性光谱法定量检测试剂盒 |
細胞谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性光谱法定量检测试剂盒 |
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通用型乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒 |
细胞乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒 |
组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒 |
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通用型肌酐(CREATININE)化学比色法定量检测试剂盒 |
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血液肌酐(CREATININE)化学比色法定量检测试剂盒 |
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通用型肌酐(CREATININE)酶连续反应比色法定量检测试剂盒 |
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内容提示:共聚焦封片显微镜简介及免疫荧光染色
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