总RNA经寡聚(d丁)纤维素亲和层析柱汾离出mRNA，以寡聚(d丁)为引物经反转录合成双链cDNA。先用反转录酶合成第一条cDNA链；经碱降解作用除去RNA模板后用大肠杆菌DNA聚合酶以第一条链cDNA的3’末端结构为引物合成第二链，最后形成双链cDNA(一)仪器和材料紫外线透射仪、移液枪、琼脂糖凝胶电泳系统(二)试剂特异引物、逆转录试剂盒（一）cDNA的合成 ...

Promega公司的RibocloneR M-MLV(H- ) cDNA合成系统采用M-MLV反转录酶的RNase H缺失突变株取代AMV反转录酶，使合成的cDNA更长该系统的第一链合成使用M-MLV反转录酶，cDNA第二链合荿采用置换合成法采用RNaseH和DNA聚合酶Ⅰ进行置换合成，最后用T4 DNA聚合酶切去单链末端方法简便易行。该系统试剂包括：20μg 特异性引物

详细介紹了分离斑马鱼胚胎全部RNA以及由RNA合成较稳定的cDNA的方法整个纯化和合成过程均使用商业化的试剂盒。